中文名稱:	CCL4誘導小鼠肝髒纖維化(huà)模型	英文名稱:	CCL4-induced mice liver fibrosis model
類型:	肝纖維化(huà)動物(wù)模型	分(fēn)級:	NA
研制單位:	中國醫學科學院醫學實驗動物(wù)研究所	保存單位:	中國醫學科學院醫學實驗動物(wù)研究所
主要用(yòng)途:	用(yòng)于抗肝損傷和(hé)纖維化(huà)藥物(wù)評估的(de)主要研究模型。
是否通(tōng)過鑒定與評價:

一、研究背景

肝纖維化(huà)是一個(gè)病理(lǐ)生理(lǐ)過程，是指由各種緻病因子所緻肝内結締組織異常增生。任何肝髒損傷在肝髒修複愈合的(de)過程中都有肝纖維化(huà)的(de)過程，如果損傷因素長(cháng)期不能去除，纖維化(huà)的(de)過程長(cháng)期持續就會發展成肝硬化(huà)。臨床症狀常見疲乏無力、食欲減退、慢(màn)性消化(huà)不良、出血等。治療主要是針對(duì)原發病的(de)病因治療。病因多(duō)見于病毒性肝炎、酒精肝、脂肪肝、自身免疫性疾病等。

四氯化(huà)碳動物(wù)模型是目前應用(yòng)于抗肝損傷和(hé)纖維化(huà)藥物(wù)評估的(de)主要研究模型。其作用(yòng)機制爲：在肝細胞内質網中，四氯化(huà)碳被肝微粒體細胞色素P450氧化(huà)酶激活後生成三氯化(huà)碳，與肝細胞内大(dà)分(fēn)子發生共價結合，破壞肝細胞功能。此外，還(hái)可(kě)攻擊肝細胞膜的(de)磷脂，引起脂質過氧化(huà)破壞膜性結構，損傷肝細胞。

二、制備方法

 1.C57小鼠，

品系來(lái)源 ：1)遺傳背景及亞系:1921年Ltle用(yòng) Abbg Lathrop的(de)小鼠株雌鼠57号與雄鼠52号交配，而得(de)C57BL6。亞系:C57BL6、C57B/6、C57BL/6N等。             (2)毛色基因标記：aa、BB、CC（黑(hēi)色）                                          

(3)主要遺傳學特征：a免疫學特征：一般飼養條件下(xià)免疫球蛋白的(de)量随年齡而增加，而到生後20個(gè)月(yuè)時(shí)則1gG增長(cháng)緩慢(màn)，無菌飼養的(de)絕對(duì)量較低。IgM水(shuǐ)平較高(gāo)，出生12月(yuè)以後，有的(de)個(gè)體超過80ug/mL。無菌飼養的(de)動物(wù)lgM量比一般飼養的(de)高(gāo)。細胞免疫低下(xià)者少見，這(zhè)可(kě)能與自發腫瘤少有關。b。形态學特征：在新生鼠中，雌鼠爲16.8%，雄鼠3%爲小眼或無眼症。0.6%後肢可(kě)見多(duō)趾症，另外水(shuǐ)頭症占2%~4%，耳頭症占0.4%，交合不全占3%。c生理(lǐ)學特性：有強嗜酒精性。對(duì)放射性照(zhào)射爲中等強度感應度，LD50爲630+4R，将雄鼠皮膚移植到同系的(de)雌鼠身上，約20日被排斥掉，這(zhè)是因爲在組織相容性抗原中的(de)雄抗原在C57BL中非常顯著。d癌發生率：乳癌發生率低,不足1%，白血病爲7%-16%化(huà)學緻癌成功率低，放射性照(zhào)射較容易誘發肝癌。

 2.肝纖維化(huà)對(duì)照(zhào)小鼠：C57 小鼠 ，專業名稱：C57。

3.誘導方法：腹腔注射CCl4的(de)油劑溶液（50 ul/10g體重，CCl4：橄榄油=1:9），每周注射三次，隔一天一次，連續注射4-6周，每周稱重一次，實驗結束前，禁食4小時(shí)，取血液測量血生化(huà)等指标，取肝髒進行稱重，病理(lǐ)及相關蛋白分(fēn)析。

三、評價與驗證

一、肝髒大(dà)體形态變化(huà)

腹腔注射CCl4的(de)油劑溶液（50 ul/10g體重，CCl4：橄榄油=1:9），每周注射三次，隔一天一次，連續注射4周，取肝髒組織。

二、肝髒纖維化(huà)指标檢測

腹腔注射CCl4的(de)油劑溶液（50 ul/10g體重，CCl4：橄榄油=1:9），每周注射三次，隔一天一次，連續注射4周，取肝髒組織行Western Blot檢測肝纖維化(huà)相關蛋白

 三、肝髒馬松染色

腹腔注射CCl4的(de)油劑溶液（50 ul/10g體重，CCl4：橄榄油=1:9），每周注射三次，隔一天一次，連續注射4周，取肝髒組織，10%福爾馬林(lín)固定，制成石蠟切片行馬松染色。

四、鑒定和(hé)評價的(de)其他(tā)材料

1. Shrestha etal. Glutamine inhibits CCl4 induced liver fibrosis in mice and TGF-β1 mediated epithelial-mesenchymal transition in mouse hepatocytes. Food Chem Toxicol 2016, 93:129-37.