一、研究背景

胃腸黏膜損傷導緻的(de)胃腸疾病是一種臨床上常見的(de)急、慢(màn)性消化(huà)系統疾病，常反複發作，給患者的(de)身心健康帶來(lái)極大(dà)的(de)危害，建立理(lǐ)想的(de)胃腸黏膜損傷性消化(huà)道動物(wù)模型，對(duì)探索該病的(de)病因、發病機制、病變發展規律，明(míng)确治療方法及研發新藥均有積極意義。目前報道的(de)胃腸黏膜損傷動物(wù)模型造模方法主要有:應激性造模、藥物(wù)造模、乙酸或乙醇緻胃潰瘍模型等。早期有研究者采用(yòng)能選擇性破壞中腦(nǎo)黑(hēi)質多(duō)巴胺能神經元的(de)毒性物(wù)質 1-甲基-4-苯基-l，2，3，6-四氫吡啶(MPTP)，腹腔注射大(dà)鼠後導緻其胃、十二指腸黏膜損傷和(hé)潰瘍。

二、制備方法

1.  誘導劑準備

 MPTP溶于生理(lǐ)鹽水(shuǐ)。

2.  實驗動物(wù)

普通(tōng)級雄性樹鼩。

3.  給藥

造模組和(hé)生理(lǐ)鹽水(shuǐ)對(duì)照(zhào)組。造模組腹腔給與不同劑量的(de) MPTP溶液造模。成年健康雄性樹鼩 12 隻,随機分(fēn)爲 3 組，每組 4 隻，分(fēn)别爲 2 mg/kg 劑量組、1 mg/kg 劑量組和(hé)對(duì)照(zhào)組腹腔注射等體積生理(lǐ)鹽水(shuǐ)，連續 56 d。

4.  模型分(fēn)析指标

（1）  腦(nǎo)脊液中胺(dopamine)含量測定

56d後，采用(yòng)1%戊巴比妥鈉溶液按每100 g體重0.2 mL 劑量對(duì)樹鼩腹腔注射麻醉，待樹鼩麻醉後采集腦(nǎo)脊液，用(yòng)高(gāo)效液相色譜儀測量腦(nǎo)脊液中多(duō)巴胺(dopamine)含量。

三、評價與驗證

1.  一般情況的(de)觀察

2mg/kg 劑量組腹腔注射MPTP[2 mg/(kg·d)]後，其中有2隻樹鼩先後出現了(le)一過性、暫時(shí)性的(de)急性帕金森綜合征症狀(如:行動緩慢(màn)，反映遲鈍，四肢無力，步态不穩，不能站立)，2隻樹鼩之間表現強弱略有細微差異，均在每天給藥後持續約5 min左右，之後恢複正常。但上述帕金森症狀是隻有在腹44中國比較醫學雜(zá)志2018年3月(yuè)第28卷第3期 Chin J Comp Med，March 2018，Vol．28．No．3腔注射MPTP之後才會出現的(de)急性症狀，而且此症狀持續一周之後就不再出現。其它指标和(hé)其它樹鼩相同，即腹腔注射後至第3周末，精神狀态、毛色、排糞尿正常，但食欲下(xià)降，活動量減少，第4周開始對(duì)照(zhào)組逐漸恢複正常，模型組依舊(jiù)活動量少，食欲明(míng)顯下(xià)降，毛皮蓬松沒有光(guāng)澤，排糞時(shí)好時(shí)壞，部分(fēn)

樹鼩糞便呈黑(hēi)色。

2.  樹鼩體重變化(huà)情況

每周稱量體重一次發現，1mg/kg劑量組和(hé)2mg/kg劑量組從開始至第8周體重均出現逐漸下(xià)降趨勢;對(duì)照(zhào)組從實驗開始到第4周出現體重下(xià)降，第4開始逐漸上升直至恢複，

3.  樹鼩腦(nǎo)脊液中多(duō)巴胺含量檢測結果

多(duō)巴胺含量檢測結果顯示，模型組樹鼩腦(nǎo)脊液多(duō)巴胺含量均比對(duì)照(zhào)組樹鼩的(de)多(duō)巴胺含量明(míng)顯減少(P＜0.05);1mg/kg劑量組和(hé)2mg/kg劑量組比較差異無顯著性(P＞0.05)。提示注射MPTP能選擇性破壞樹鼩中腦(nǎo)黑(hēi)質多(duō)巴胺能神經元，使樹鼩腦(nǎo)脊液中多(duō)巴胺含量明(míng)顯降低。

4.  形态學觀察結果

2mg/kg、1mg/kg劑量組肉眼均可(kě)見樹鼩胃腸外形大(dà)小、顔色正常;也(yě)可(kě)觀察到胃腸道表面布滿淤血，内容物(wù)呈黑(hēi)色。體視鏡下(xià)兩組均有不同程度的(de)胃腸黏膜損傷，具體表現爲，胃黏膜局部充血或有彌漫性出血點，内壁上多(duō)處紅腫出血，覆蓋白色苔狀物(wù)(如圖2B)，或胃黏膜部分(fēn)輕微脫落，多(duō)處呈異樣粉紅色，内壁上有零星散在輕微出血點(如圖2C)，胃窦與十二指腸則表現爲正常無異樣狀況;也(yě)有十二指腸黏膜顔色略微加深，覆蓋白色苔狀物(wù)，壁上多(duō)處紅腫出血，或有散在出血點(如圖2D)。但兩組在胃腸黏膜損傷程度上沒有明(míng)顯區(qū)别;對(duì)照(zhào)組肉眼和(hé)體視鏡下(xià)觀察，4隻樹鼩胃、十二指腸均無異常表現，胃内容物(wù)少，胃腸黏膜完整清潔，結構完整，大(dà)小、形态、顔色均正常。

5.  HE 染色結果

2mg/kg和(hé)1mg/kg劑量組大(dà)部分(fēn)樹鼩鏡下(xià)見正常胃壁黏膜;胃體黏膜可(kě)見少許淋巴細胞及漿細胞浸潤，部分(fēn)表層黏膜脫落，少部分(fēn)樹鼩可(kě)見胃黏膜損傷明(míng)顯，突出表現爲黏膜下(xià)細胞水(shuǐ)腫，部分(fēn)胃黏膜結構紊亂，伴随有出血、脫落的(de)壞死黏膜，或有粘膜上皮脫落，固有層充血，并有炎性細胞浸潤，杯狀細胞增多(duō)，粘膜下(xià)層充血水(shuǐ)腫并有炎性細胞滲出，肌纖維間有大(dà)量炎性細胞浸潤(如圖3B);胃窦部胃小凹粘膜上皮脫離，固有層出血，并有炎性細胞浸潤，胃腺杯狀細胞增多(duō)，少許樹鼩腸腺上皮細胞發生化(huà)生，粘膜下(xià)層充血，有炎性細胞滲出，肌層細胞發生變性壞死(如圖3C);十二指腸粘膜上皮脫落，固有層充血，粘膜的(de)杯狀細胞增多(duō)，部分(fēn)區(qū)域出現了(le)炎細胞的(de)慢(màn)性炎症改變，少許樹鼩有固有層和(hé)粘膜下(xià)層的(de)結締組織增生，有多(duō)量淋巴細胞浸潤(如圖3D)，兩組比較無明(míng)顯區(qū)别。對(duì)照(zhào)組樹鼩胃腸主細胞、壁細胞形态正常，胃壁漿膜層、肌層、黏膜下(xià)層、黏膜層四層結構清晰完整，黏膜層腺體排列整齊。

四、鑒定和(hé)評價的(de)其他(tā)材料

1.慢(màn)性胃腸黏膜損傷樹鼩模型建立的(de)探索，【文章(zhāng)編号】1671-7856(2018) 03-0043-05

doi: 10. 3969/j． issn． 1671 －7856. 2018. 03. 008葉尤松