一、研究背景

Mbd4基因編碼的(de)蛋白質是一種多(duō)結構域蛋白，包括一個(gè)C端單功能胸腺嘧啶-尿嘧啶DNA糖基化(huà)酶和(hé)一個(gè)N端甲基- cpg結合域（MBD），其甲基- cpg結合域将酶定位于基因組的(de)富含cpg的(de)區(qū)域，啓動堿基切除修複(BER)，修正由于5-甲基胞嘧啶(5MeC)或胞嘧啶脫氨産生的(de)T:G或U:G錯配。研究表明(míng)，MBD4介導的(de)DNA修複可(kě)能對(duì)慢(màn)性炎症組織的(de)緻癌作用(yòng)非常重要。在人(rén)類中，MBD4的(de)序列和(hé)表達的(de)改變與癌症風險的(de)升高(gāo)有關。MBD4 Glu346Lys多(duō)态性與結腸直腸癌、食管鱗狀細胞癌和(hé)肺腺癌的(de)風險增加相關。在一些自身免疫性疾病中也(yě)觀察到MBD4的(de)多(duō)态性或表達改變，這(zhè)表明(míng)MBD4與反常的(de)免疫反應之間可(kě)能存在聯系。在小鼠實驗表明(míng)Mbd4可(kě)以抑制潰瘍性結直腸炎症相關的(de)結腸癌小鼠模型的(de)發病率和(hé)死亡率：Mbd4−/−小鼠比野生型小鼠的(de)生存時(shí)間更短，死亡時(shí)的(de)腫瘤負荷更大(dà)，臨床症狀更嚴重。組織病理(lǐ)學檢查也(yě)發現Mbd4−/−小鼠的(de)炎症和(hé)組織損傷更嚴重。NPSG小鼠爲無T，B及NK細胞的(de)NPSG重度聯合免疫缺陷小鼠，其免疫系統缺陷程度與NSG及NOG小鼠同級，體質較強，适用(yòng)于各類異體移植模型及免疫系統重建模型。

二、制備方法

 F0代構建：采用(yòng)Cas9進行基因定點敲入。

三、評價與驗證

 Mbd4基因編碼的(de)蛋白MBD4介導DNA修複，可(kě)能對(duì)慢(màn)性炎症組織的(de)緻癌作用(yòng)非常重要。在人(rén)類中，MBD4的(de)序列和(hé)表達的(de)改變與癌症風險的(de)升高(gāo)有關。MBD4 Glu346Lys多(duō)态性與結腸直腸癌、食管鱗狀細胞癌和(hé)肺腺癌的(de)風險增加相關。在小鼠實驗表明(míng)Mbd4可(kě)以抑制潰瘍性結直腸炎症相關的(de)結腸癌小鼠模型的(de)發病率和(hé)死亡率。