腺病毒表達系統中的(de)難點主要在于怎麽将外源基因表達框或者外源的(de)shRNA表達框構建至腺病毒骨架載體上。由于腺病毒骨架載體比較大(dà)（~30kb），而且載體中的(de)一些常用(yòng)酶切位點幾乎都有多(duō)個(gè)，如果用(yòng)常規的(de)酶切-連接的(de)方式将外源基因或者shRNA表達框構建至腺病毒骨架載體上，成功率很低，因此，腺病毒表達系統基本上都是用(yòng)同源重組的(de)方法将外源基因或shRNA表達框構建至腺病毒骨架載體上。