免疫組化(huà)

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免疫組化(huà)

免疫組化(huà)

      免疫組化(huà),是應用(yòng)免疫學基本原理(lǐ)——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的(de)原理(lǐ),通(tōng)過化(huà)學反應使标記抗體的(de)顯色劑(熒光(guāng)素、酶、金屬離子、同位素)顯色來(lái)确定組織細胞内抗原(多(duō)肽和(hé)蛋白質),對(duì)其進行定位、定性及相對(duì)定量的(de)研究。



      抗體和(hé)抗原之間的(de)結合具有高(gāo)度的(de)特異性,免疫組織化(huà)學正是利用(yòng)了(le)這(zhè)一原理(lǐ)。先将組織或細胞中的(de)某種化(huà)學物(wù)質提取出來(lái),以此作爲抗原或半抗原,通(tōng)過免疫動物(wù)後獲得(de)特異性的(de)抗體,再以此抗體去探測組織或細胞中的(de)同類的(de)抗原物(wù)質。由于抗原與抗體的(de)複合物(wù)是無色的(de),因此還(hái)必須借助于組織化(huà)學的(de)方法将抗原抗體結合的(de)部位顯示出來(lái),以期達到對(duì)組織或細胞中的(de)未知抗原進行定性,定位或定量的(de)研究。


      實驗所用(yòng)主要爲組織标本和(hé)細胞标本兩大(dà)類,前者包括石蠟切片(病理(lǐ)切片和(hé)組織芯片)和(hé)冰凍切片,後者包括組織印片、細胞爬片和(hé)細胞塗片。
      其中石蠟切片是制作組織标本常用(yòng)、基本的(de)方法,對(duì)于組織形态保存好,且能作連續切片,有利于各種染色對(duì)照(zhào)觀察;還(hái)能長(cháng)期存檔,供回顧性研究;石蠟切片制作過程對(duì)組織内抗原暴露有一定的(de)影(yǐng)響,但可(kě)進行抗原修複,是免疫組化(huà)中常用(yòng)的(de)組織标本制作方法。

      免疫組化(huà)實驗中常用(yòng)的(de)抗體爲單克隆抗體和(hé)多(duō)克隆抗體,單克隆抗體是一個(gè)B淋巴細胞克隆分(fēn)泌的(de)抗體,應用(yòng)細胞融合雜(zá)交瘤技術免疫動物(wù)制備。多(duō)克隆抗體是将純化(huà)後的(de)抗原直接免疫動物(wù)後,從動物(wù)血中所獲得(de)的(de)免疫血清,是多(duō)個(gè)B淋巴細胞克隆所産生的(de)抗體混合物(wù)。



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