DSS潰瘍性結腸炎實驗:是達爲科生物(wù)較爲成熟的(de)動物(wù)模型之一,由細胞平台經驗豐富的(de)實驗人(rén)員(yuán)操作完成。
本實驗模型使用(yòng)小鼠、大(dà)鼠、兔等動物(wù)均可(kě)造模,通(tōng)過給予動物(wù)自由飲用(yòng)不同濃度的(de)DSS(MW:36000~50000)水(shuǐ)溶液,根據用(yòng)藥時(shí)間及用(yòng)藥周期可(kě)制成急性和(hé)慢(màn)性兩種結腸炎模型。該模型症狀表現與人(rén)類UC極爲相似,主要表現爲腹瀉、黏液樣便、糞便潛血、肉眼血便、重量減輕、活動度減少,毛色變差等。
一、實驗準備
1.實驗動物(wù):C57BL/6或BALB/c,雌性,6-8周。每組至少8-10隻小鼠。
2.造模試劑:DSS,Mw 36000-50000,含硫量17-20%。
3.DSS濃度:急性期模型通(tōng)常爲3-5%,慢(màn)性期模型通(tōng)常爲1-3%;可(kě)根據實驗需求及動物(wù)類型摸索濃度。該濃度爲質量體積比,使用(yòng)飲用(yòng)水(shuǐ)配置後,過濾除菌。
二、模型構建
慢(màn)性與急性結腸炎模型的(de)構建時(shí)間分(fēn)别爲:8天與50天,使用(yòng)DSS濃度爲3-5%和(hé)1-3%,之後脫頸,取腸道組織,進行相應病理(lǐ)染色。
三、如何評價造模是否成功
1)疾病活躍指數評分(fēn):
從三個(gè)方面進行評估打分(fēn),分(fēn)别爲體重、糞便粘稠度、糞便潛血等指标。
2)組織學變化(huà)評分(fēn):
a)潰瘍形成個(gè)數;
b)上皮細胞變化(huà);
c)炎症浸潤;
d)淋巴結形成;
組織學分(fēn)析的(de)标準方法爲HE染色。
3)結腸長(cháng)度:
急性結腸炎模型中,第8天可(kě)檢測到結腸長(cháng)度縮短;慢(màn)性結腸炎模型中,結腸長(cháng)度縮短更加明(míng)顯。